培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細(xì)胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細(xì)胞所需pH在-。但是,細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進(jìn)行緩沖,因此,氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為;如果CO2濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉()共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。Ham’s F-12營養(yǎng)混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)初用于CHO細(xì)胞的無血清培養(yǎng)。北京昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,采用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基**初是為淋巴細(xì)胞培訓(xùn)專門設(shè)計的,現(xiàn)在已普遍應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和惡性**的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和惡性**,是采用極其普遍的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比之下其他培養(yǎng)基之所以具與眾不同的功效,是因為其中富含還原劑谷胱甘肽和高濃度的維他命。RPMI1640培養(yǎng)基包含生物素、維他命B12以及PABA,這些成份是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對普遍的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的RPMI1640改進(jìn)培養(yǎng)基。浙江華晨陽細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商M199全稱Medium 199,廣泛應(yīng)用于各種動物細(xì)胞的培養(yǎng),包括一些非哺乳類動物細(xì)胞。
在細(xì)胞培養(yǎng)實驗里,DMEM 培養(yǎng)基的使用過程需嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范。收到培養(yǎng)基后,應(yīng)及時存放于 2-8°C 的環(huán)境中,低溫可有效減緩培養(yǎng)基內(nèi)成分的降解速度,確保其營養(yǎng)成分的穩(wěn)定性。在使用前,需將培養(yǎng)基預(yù)熱至 37°C,模擬人體體溫環(huán)境,讓細(xì)胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養(yǎng)基多采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),需將培養(yǎng)環(huán)境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細(xì)調(diào)控培養(yǎng)基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區(qū)間,為細(xì)胞打造穩(wěn)定且舒適的 “居住空間”,促進(jìn)細(xì)胞健康生長。
Grace’s昆蟲培養(yǎng)基是由Grace改良的Wyatt培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基與昆蟲血淋巴的化學(xué)成分更為相近,Grace使用這種培養(yǎng)基成功建立了***個昆蟲連續(xù)細(xì)胞系。Grace’s昆蟲培養(yǎng)基**初用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)細(xì)胞的培養(yǎng),適當(dāng)補(bǔ)充添加劑后,Grace’s昆蟲培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)各種昆蟲細(xì)胞,包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲的細(xì)胞。本產(chǎn)品含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。Grace’s補(bǔ)充昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基**初設(shè)計用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)的細(xì)胞生長。Grace’s補(bǔ)充昆蟲培養(yǎng)基目前***用于草地貪夜蛾細(xì)胞Sf9和Sf21的生長。Sf9和Sf21細(xì)胞常規(guī)使用于桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)(BEVS)表達(dá)重組蛋白。本產(chǎn)品含有水解乳蛋白、酵母粉、L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。Grace’s補(bǔ)充昆蟲培養(yǎng)基含有Grace’s昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基(PM152011)中不常見的水解乳蛋白和酵母粉,此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。 Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍。
含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成(采用平衡鹽溶液溶解)與合成培養(yǎng)基(如MEM細(xì)胞培養(yǎng)基)以1:1的比例混合使用。目前用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。此外,血清含一些對細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體等都會影響細(xì)胞生長,甚至造成細(xì)胞死亡。目前,血清多作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5~20%,常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復(fù)雜,批間差異大及存在病毒等外源污染風(fēng)險,對下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響,在生物制藥行業(yè)的使用也越來越少。因此,基于對血漿成份的分析,合成細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)運而生。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計、配制的培養(yǎng)基。開發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimalessentialmedium,MEM)。M199有兩種平衡鹽成分,Earle’s鹽成分常用于CO2環(huán)境,Hank’s鹽成分用于非CO2的環(huán)境。廣西細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家
DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營養(yǎng)成分。北京昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。不含葡萄糖的培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。 北京昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家
深圳市華晨陽科技有限公司是一家有著先進(jìn)的發(fā)展理念,先進(jìn)的管理經(jīng)驗,在發(fā)展過程中不斷完善自己,要求自己,不斷創(chuàng)新,時刻準(zhǔn)備著迎接更多挑戰(zhàn)的活力公司,在廣東省等地區(qū)的醫(yī)藥健康中匯聚了大量的人脈以及**,在業(yè)界也收獲了很多良好的評價,這些都源自于自身的努力和大家共同進(jìn)步的結(jié)果,這些評價對我們而言是比較好的前進(jìn)動力,也促使我們在以后的道路上保持奮發(fā)圖強(qiáng)、一往無前的進(jìn)取創(chuàng)新精神,努力把公司發(fā)展戰(zhàn)略推向一個新高度,在全體員工共同努力之下,全力拼搏將共同深圳市華晨陽科技供應(yīng)和您一起攜手走向更好的未來,創(chuàng)造更有價值的產(chǎn)品,我們將以更好的狀態(tài),更認(rèn)真的態(tài)度,更飽滿的精力去創(chuàng)造,去拼搏,去努力,讓我們一起更好更快的成長!