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Pfenex的CRM197是一種通過(guò)基因工程改造的無(wú)毒白喉du su,常用于疫苗生產(chǎn)。Pfenex利用其的Pfenex Expression Technology平臺(tái),在大腸桿菌中高效生產(chǎn)高質(zhì)量的重組蛋白。CRM197作為載體蛋白,能夠增強(qiáng)多糖抗原的免疫反應(yīng),...
在進(jìn)入全球研究環(huán)境后,單和多器官芯片逐漸成為從疾病模型到藥物再利用的強(qiáng)大藥物發(fā)現(xiàn)和開(kāi)發(fā)工具。為了提高臨床成功的機(jī)會(huì),制藥行業(yè)目前正在評(píng)估和采用這些技術(shù),同時(shí)技術(shù)開(kāi)發(fā)人員繼續(xù)追求將MPS應(yīng)用于藥物開(kāi)發(fā)的追求。CNBio的器官芯片系統(tǒng),包括單器官芯片和多器官芯片版...
為什么關(guān)注器官芯片的人越來(lái)越多,比較大的原因是進(jìn)入臨床的藥物有90%失敗了,導(dǎo)致沒(méi)上市。因?yàn)槟壳暗呐R床前的傳統(tǒng)的模型,比如2D培養(yǎng)或者動(dòng)物實(shí)驗(yàn),在預(yù)測(cè)藥物毒性和有效性上不總是有效。標(biāo)準(zhǔn)方法,例如2D培養(yǎng)的細(xì)胞通常過(guò)度喂養(yǎng),不能展示一種細(xì)胞的體內(nèi)生理特征。有很多...
在病毒附著到宿主細(xì)胞后,病毒RNA滲透進(jìn)宿主細(xì)胞,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過(guò)程中,RNA的兩端都進(jìn)行了復(fù)制,產(chǎn)生了長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運(yùn)送...
注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的...
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了han ran細(xì)胞的類(lèi)型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒han ...
生理相關(guān)性一直是原代細(xì)胞和干細(xì)胞在體外檢測(cè)中應(yīng)用的驅(qū)動(dòng)力。英國(guó)CNBio的PhysioMimix能夠快速輕松地創(chuàng)建3D組織模擬物與自動(dòng)化控制微流體,用于長(zhǎng)期細(xì)胞培養(yǎng),產(chǎn)生信息豐富的分析。選擇正確的細(xì)胞是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。維持細(xì)胞表型對(duì)于研究復(fù)雜的生物過(guò)程,自分泌...
腸道藥物吸收的測(cè)定通常采用靜態(tài)2D單層培養(yǎng)中的結(jié)腸腺ai細(xì)胞(Caco-2)。盡管它們很受歡迎,但Caco-2分析存在固有的局限性,導(dǎo)致對(duì)細(xì)胞瓶藥物轉(zhuǎn)運(yùn)的嚴(yán)重預(yù)測(cè)不足。創(chuàng)新的器官芯片技術(shù)為克服這一問(wèn)題提供了機(jī)會(huì),因?yàn)榭梢愿_地復(fù)制體內(nèi)條件。改善腸道MPS上皮...
逐年增加的文獻(xiàn)發(fā)表說(shuō)明了科學(xué)家對(duì)器官芯片的關(guān)注度增加??梢钥闯鰜?lái),無(wú)數(shù)的器官芯片公司獲得資助而成立,比如CN-Bio。我們現(xiàn)在看到來(lái)自于學(xué)術(shù)界、器官芯片供應(yīng)商、和藥物企業(yè)所發(fā)表的文獻(xiàn)。CN-Bio也正為這一領(lǐng)域做出貢獻(xiàn),一篇英國(guó)皇家學(xué)院的關(guān)注NASH的文章正被...
在進(jìn)入全球研究環(huán)境后,單和多器官芯片逐漸成為從疾病模型到藥物再利用的強(qiáng)大藥物發(fā)現(xiàn)和開(kāi)發(fā)工具。為了提高臨床成功的機(jī)會(huì),制藥行業(yè)目前正在評(píng)估和采用這些技術(shù),同時(shí)技術(shù)開(kāi)發(fā)人員繼續(xù)追求將MPS應(yīng)用于藥物開(kāi)發(fā)的追求。CNBio的器官芯片系統(tǒng),包括單器官芯片和多器官芯片版...
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:KyforaBiobyPolysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產(chǎn)品,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子,每相隔二個(gè)碳原子,即每“第...
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DN...
面對(duì)新興傳染病的挑戰(zhàn),如COVID-19等,Pfenex的CRM197展示了其在應(yīng)對(duì)新病原體方面的潛力。作為疫苗開(kāi)發(fā)的重要組成部分,CRM197能夠?yàn)樾虏≡w的快速疫苗設(shè)計(jì)提供理想的載體平臺(tái)。這種靈活性和效率高性使得CRM197在全球公共衛(wèi)生緊急事件中具有重要...
為什么關(guān)注器官芯片的人越來(lái)越多,比較大的原因是進(jìn)入臨床的藥物有90%失敗了,導(dǎo)致沒(méi)上市。因?yàn)槟壳暗呐R床前的傳統(tǒng)的模型,比如2D培養(yǎng)或者動(dòng)物實(shí)驗(yàn),在預(yù)測(cè)藥物毒性和有效性上不總是有效。標(biāo)準(zhǔn)方法,例如2D培養(yǎng)的細(xì)胞通常過(guò)度喂養(yǎng),不能展示一種細(xì)胞的體內(nèi)生理特征。有很多...
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DN...
現(xiàn)在我要講一下我們的器官芯片,CN-Biophysiomimix。技術(shù)誕生于2012年由DARPA資助的MIT和Harvard之間的技術(shù)競(jìng)賽。在這期間,開(kāi)發(fā)的技術(shù)在20家前列藥企的8家中得以使用,2016年MIT和CN因7和10qi guan的串聯(lián)研究,贏得競(jìng)...
對(duì)于某些類(lèi)型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。...
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟...
CRM197的開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程嚴(yán)格遵循國(guó)際質(zhì)量管理體系和法律法規(guī)要求,確保產(chǎn)品的安全性、有效性和符合性。Pfenex在每個(gè)生產(chǎn)階段都實(shí)施了嚴(yán)格的質(zhì)量控制和監(jiān)測(cè),從原材料的選擇和測(cè)試到Zui終產(chǎn)品的純化和包裝。這種質(zhì)量保證措施不僅保證了CRM197的品質(zhì)高和一致性...
抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,包括從Researchgrade到cGMP等級(jí)的無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基質(zhì),轉(zhuǎn)染試劑、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clini...
細(xì)胞分盤(pán):通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h...
CN-Bio使得器官芯片在藥物研發(fā)的一系列流程中得以應(yīng)用,從早期的靶點(diǎn)開(kāi)發(fā)一直到支持臨床前開(kāi)發(fā)。比如可以用于疾病建模,早期研發(fā),鑒定新的藥靶,理解疾病進(jìn)展的機(jī)制。同樣的疾病模型還可用于支持臨床開(kāi)發(fā)以及非正式的臨床設(shè)計(jì)。在CN-Bio,我們研發(fā)了先進(jìn)的HBV和代...
材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長(zhǎng)的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲(chǔ)存液(100μM):稱(chēng)取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過(guò)濾,儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl...
慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的慢病毒顆粒,需要利用表達(dá)載體和包裝載體同時(shí)共轉(zhuǎn)染293細(xì)胞或其衍生細(xì)胞,在細(xì)胞中進(jìn)行病毒的包裝,包裝好的慢...
在ai癥研究中一直積極尋求使用類(lèi)器guan,其中考慮患者間和患者內(nèi)的異質(zhì)性對(duì)zhi療的發(fā)展至關(guān)重要。同樣,通過(guò)使用來(lái)自同一個(gè)人的細(xì)胞創(chuàng)建器官芯片來(lái)研究多種劑量,藥物和時(shí)間點(diǎn),可以減少某些環(huán)境下的變異性。建立轉(zhuǎn)化相關(guān)性對(duì)于將器官芯片成功整合到臨床前研究中至關(guān)重要...
近幾年LentiBOOST作為一種無(wú)毒性的化學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑guang fan引起關(guān)注。LentiBOOST通過(guò)與細(xì)胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。研究證實(shí)LentiBOOST在不影響轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞存活、增殖及分化能力的前提下,提高小鼠T...
影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個(gè)關(guān)鍵參數(shù)是ganran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個(gè)細(xì)胞ganran的病毒粒子個(gè)數(shù),病毒粒子滴度以ganran單位(IU)/mL或TU/mL表示。慢病毒的ganran能力隨細(xì)胞類(lèi)型的不同而不同,因此每種不同的細(xì)胞類(lèi)型需要不同的MOI。MO...
微物理系統(tǒng)(MPS)又稱(chēng)OrganonChip(OOC)、器官芯片,旨在表征人體組織的結(jié)構(gòu)和功能特征。與傳統(tǒng)的二維平皿細(xì)胞培養(yǎng)相比,MPS可以利用多種細(xì)胞類(lèi)型,在三維支架中培養(yǎng),在灌注狀態(tài)下模擬組織中的血流。它們可用于臨床前藥物吸收、分布、代謝和排泄(ADME...
CRM197的開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程嚴(yán)格遵循國(guó)際質(zhì)量管理體系和法律法規(guī)要求,確保產(chǎn)品的安全性、有效性和符合性。Pfenex在每個(gè)生產(chǎn)階段都實(shí)施了嚴(yán)格的質(zhì)量控制和監(jiān)測(cè),從原材料的選擇和測(cè)試到Zui終產(chǎn)品的純化和包裝。這種質(zhì)量保證措施不僅保證了CRM197的品質(zhì)高和一致性...
細(xì)胞分盤(pán):通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h...