HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ與IVOSⅡ一致性比對(duì)分析根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對(duì)新精子分析系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進(jìn)行一致性評(píng)價(jià),從而保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法:選用原有HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購(gòu)儀器IVOSⅡ?yàn)閷?shí)驗(yàn)儀器,對(duì)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)進(jìn)行分析比對(duì)。結(jié)果:兩臺(tái)儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗(yàn)、偏倚圖和散點(diǎn)圖的線性關(guān)系和離群值檢測(cè)所有參數(shù)均能符合比對(duì)要求,檢測(cè)結(jié)果具有相關(guān)性;對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器的檢測(cè)結(jié)果適合范圍的檢驗(yàn),當(dāng)其精子濃度r=0.988,前向運(yùn)動(dòng)精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對(duì)預(yù)期偏倚(Bc)的接受性評(píng)價(jià)表明當(dāng)精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當(dāng)前向運(yùn)動(dòng)精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項(xiàng)檢測(cè)的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實(shí)驗(yàn)儀器經(jīng)比對(duì)分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過比對(duì)分析,得出兩臺(tái)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測(cè)結(jié)果一致,可同時(shí)用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)。精子分析儀參數(shù),平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動(dòng)時(shí)的時(shí)均速率。慢速運(yùn)動(dòng)精子分析DSL
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評(píng)估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽?,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對(duì)染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測(cè)量[3]。與人工操作相比,自動(dòng)化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員的手工評(píng)估。兩個(gè)研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動(dòng)分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會(huì)進(jìn)一步增加[7]。上??焖龠\(yùn)動(dòng)精子分析ALHHamilton Thorne精子分析儀是一款功能強(qiáng)大、準(zhǔn)確可靠的精子質(zhì)量評(píng)估設(shè)備。
人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容,更具可操作性。本手冊(cè)對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開儲(chǔ)存;對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序;所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng),以監(jiān)測(cè)溫度和液氮液位,傳感器應(yīng)連接警報(bào)器,可通過實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍,可以防止冰晶的形成,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中,也可以使用封閉系統(tǒng),不需要無菌的液氮。
精液顯微鏡檢查精子計(jì)數(shù):正常人精子計(jì)數(shù)為0.6×1012~1.5×0.012/L,相當(dāng)于一次排出的精子總數(shù)為400×106~600×106。當(dāng)精子計(jì)數(shù)值<20×106/ml或一次排精總數(shù)<100×106為精子減少,超過致孕極限而導(dǎo)致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,是導(dǎo)致少精或無精的重要原因,也是導(dǎo)致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結(jié)扎術(shù)的效果觀察。結(jié)扎六周后,連續(xù)檢查無精子,說明手術(shù)成功,如果結(jié)扎兩個(gè)月后,精液中仍有精子,說明手術(shù)不成功。傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法,準(zhǔn)確率有待提高。
通過結(jié)果的生物學(xué)意義對(duì)結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測(cè)試中表現(xiàn)出較小的可變性時(shí)則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評(píng)估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動(dòng)性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運(yùn)動(dòng)精子百分率上的相關(guān)性較低]。Holt等報(bào)道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對(duì)**參數(shù)值進(jìn)行比較,其結(jié)果為:采用同一個(gè)測(cè)定池由不同的操作者測(cè)定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動(dòng)精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯(cuò)誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來評(píng)估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運(yùn)動(dòng)性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動(dòng)性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)(授精I(xiàn)VF)的發(fā)展使檢測(cè)精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能;同樣可以驗(yàn)證CASA測(cè)定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。CASA系統(tǒng)用量少,檢測(cè)速度快,能夠顯著提高實(shí)驗(yàn)室的工作效率。美國(guó)魚精子分析DSL
精子分析儀能分析與精子運(yùn)動(dòng)功能相關(guān)的各種參數(shù)。慢速運(yùn)動(dòng)精子分析DSL
七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子:<10%-15%;凝集精子:<10%;未成熟精細(xì)胞:<1%。[臨床意義]1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時(shí)已進(jìn)入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損于精子形態(tài)。2.精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細(xì)精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時(shí),精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細(xì)胞。八、精液細(xì)胞檢查[正常參考值]白細(xì)胞(WBC):<5個(gè)/HP(高倍鏡視野);紅細(xì)胞(RBC):0-偶見/HP。[臨床意義]1.精液中白細(xì)胞增多,常見于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2.精液中紅細(xì)胞增多,常見于精囊結(jié)核、前列腺*等。3.精液中若查到*細(xì)胞,對(duì)生殖系*有診斷意義。慢速運(yùn)動(dòng)精子分析DSL