前沿性檢查:目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù)。有研究認(rèn)為,氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素;新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊(cè)重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分,強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求,增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。在精子研發(fā)的歷程中,計(jì)算機(jī)輔助精子檢測(cè)經(jīng)歷了黑白圖像機(jī)、彩色圖像檢測(cè)。目前先進(jìn)的是熒光精子圖像檢測(cè)。香港兔子精子分析W.H.O 6
全自動(dòng)的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出。可以使用一次性的和可重復(fù)的載玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級(jí)。IVOS能提供:精確、客觀、具有重復(fù)性的結(jié)果。高速分析,在60Hz下半秒掃描30幀,為實(shí)驗(yàn)室節(jié)省成本。[1]主要功能IVOS自動(dòng)精子活動(dòng)、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng)。HamiltonThorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床、研究實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域,成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)。可以應(yīng)用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動(dòng)物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件。北京魚精子分析BCF精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較,具有速度快、量比性好、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測(cè)依據(jù)。
美國(guó)HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國(guó)內(nèi)外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室所使用。本試驗(yàn)研究目的對(duì)精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在大鼠附睪精子計(jì)數(shù)結(jié)果的比較驗(yàn)證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對(duì)三批次雄鼠的精子計(jì)數(shù)進(jìn)行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺(tái),進(jìn)行精子計(jì)數(shù),同時(shí)吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi),通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù),比較兩種計(jì)數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個(gè)批次的精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精子計(jì)數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
擴(kuò)展性檢查:可以在某些情況下由實(shí)驗(yàn)室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項(xiàng)目。手冊(cè)增加了精子DNA損傷、遺傳學(xué)和炎癥細(xì)胞等相關(guān)檢查項(xiàng)目。提出了基因突變是導(dǎo)致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關(guān)細(xì)胞因子、趨化因子等檢測(cè)的方法、試劑、檢測(cè)步驟等內(nèi)容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷,并且已有報(bào)道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關(guān)。由于與精液質(zhì)量相關(guān),精子DNA損傷檢測(cè)是男性不育檢查中的重要補(bǔ)充內(nèi)容,已成為男科學(xué)基礎(chǔ)和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標(biāo)志物之一。本版手冊(cè)增加了大量篇幅對(duì)其原理和檢測(cè)方法進(jìn)行了描述。新增了基因和基因組測(cè)序內(nèi)容。臨床上,越來越多的人意識(shí)到染色體異常[數(shù)量異常、結(jié)構(gòu)異常(包括微缺失和微重復(fù))]和基因突變是導(dǎo)致各種男性不育癥的基礎(chǔ)病因,而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測(cè)序常規(guī)在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,但一些男科實(shí)驗(yàn)室也在做同樣的檢測(cè)。為明確生殖道炎癥對(duì)于男性不育的影響,泌尿男科醫(yī)生可能提出對(duì)精液中的趨化因子和細(xì)胞因子進(jìn)行評(píng)估。本手冊(cè)納入了精液中白細(xì)胞介素檢測(cè)方法。CASA系統(tǒng)通過計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動(dòng)參數(shù),能夠提供精確的量化數(shù)據(jù),優(yōu)于人工檢測(cè)方法。
精液檢查前有什么注意事項(xiàng)?一、留精液前,病人應(yīng)停止**4~7天。檢查前1周不能用丙酸睪丸酮、**睪丸酮、苯丙酸諾龍。采取精液時(shí),可用軟皂或石蠟油做**按摩,將標(biāo)本收集在無菌的試管中;也可用避孕套(沖洗干凈,不含殺精子藥物)或采用**中斷法收集精液,但這樣收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液,可經(jīng)直腸內(nèi)按摩精囊及輸精管末端、壓迫采尿,檢查沉渣中有無精子。不要將精液暴露在過熱和過冷的環(huán)境中。及時(shí)交給醫(yī)生備查,不得超過30分鐘。冷天要注意保暖,送檢時(shí)可放在內(nèi)衣口袋里保溫。二、如果要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),應(yīng)先沖洗、消毒尿道口,再將精液收集在無菌試管中。夫妻同居3年以上,沒有采取任何避孕措施而未能受孕的稱不孕癥。如果是不孕癥,在雙方未進(jìn)行檢查前,不能盲目懷疑某一方,更不能認(rèn)為不孕的原因是女方。妊娠是夫妻雙方的事。實(shí)現(xiàn)受孕,男方的精液含量應(yīng)正常,形態(tài)和動(dòng)力也應(yīng)正常。女方能正常排卵,精子和卵子能結(jié)合成受精卵,這種受精卵能在子宮內(nèi)膜種植。上述的幾個(gè)環(huán)節(jié)中的某一個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)生障礙,都可引起不孕。三、如果上述檢查結(jié)果精液是正常的,女方也應(yīng)去醫(yī)院檢查,包括全身情況、生殖***、卵巢排卵功能、輸卵管通暢否、免疫檢查。Hamilton Thorne精子分析儀具有良好的數(shù)據(jù)管理和報(bào)告生成功能,能夠方便用戶查閱和分享分析結(jié)果。香港兔子精子分析W.H.O 6
IVOS已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進(jìn)行精子分析的代名詞。香港兔子精子分析W.H.O 6
檢查具備條件受檢者,經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,禁房事5-7天(上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí));[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè),以**方式獲取精液,一次全部射入容器,蓋上蓋,記錄標(biāo)本離體時(shí)間;貼身保溫,30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室,并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。精液常規(guī)觀察:精液總?cè)萘浚ê辽?,精子活?dòng)情況,精子密度(個(gè)/毫升),精液液化時(shí)間(標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間),不動(dòng)精子(個(gè)/高倍視野)等。見不動(dòng)精子,須染色方可區(qū)分:不活動(dòng)的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗(yàn),仍然找不到精子;方可報(bào)告無精。經(jīng)三次取樣化驗(yàn),結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無精子癥。香港兔子精子分析W.H.O 6