1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實驗室,任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計數(shù)板的方法,但計數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明,鑒別快速前向運動精子非常重要。因此,關(guān)于精子活力分級,第6版手冊建議恢復(fù)到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調(diào),精子形態(tài)學(xué)評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正?!毙螒B(tài)率的判斷,則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評估1500個精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,應(yīng)單獨計算并在報告中注明;精子分析,平均角位移(MAD)?:精子頭沿其曲線軌跡瞬時轉(zhuǎn)折角度的時均J對值?。廣州快速運動精子分析STR
人類精子冷凍保存和儲存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容,更具可操作性。本手冊對人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開儲存;對使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗程序;所有儲罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報警系統(tǒng),以監(jiān)測溫度和液氮液位,傳感器應(yīng)連接警報器,可通過實驗室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍,可以防止冰晶的形成,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中,也可以使用封閉系統(tǒng),不需要無菌的液氮。南京人精子分析頻閃光源計算機(jī)輔助精子分析根據(jù)初估的精子濃度選擇合適的檢測方法,確保檢測過程的準(zhǔn)確性和可靠性?。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。
CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度、對比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)危瑢α炼群蛯Ρ榷纫筇貏e高,檢測時應(yīng)多次試用,尋找能準(zhǔn)確識別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾,測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9],這些也是需要注意的。對于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分,如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等,可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計數(shù)在內(nèi),應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后,再涂片檢查,確認(rèn)無精后再出報告。所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn),嚴(yán)格按照使用指南進(jìn)行操作?。
CASA精子運動速度和運動軌跡特征主要參數(shù)有:①軌跡速度(VCL):也稱曲線速度,即精子頭部沿其實際行走曲線的運動速度。②平均路徑速度(VAP):精子頭沿其空間平均軌跡的運動速度,這種平均軌跡是計算機(jī)將精子運動的實際軌跡平均后計算出來的,可因不同型號的儀器而有所改變。③直線運動速度(VSL):也稱前向運動速度,即精子頭部直線移動距離的速度。④直線性(LIN):也稱線性度,為精子運動曲線的直線分離度,即VSL/VCL。⑤精子側(cè)擺幅度(ALH):精子頭實際運動軌跡對平均路徑的側(cè)擺幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型號的CASA系統(tǒng)由于計算方法不一致,因此相互之間不可直接比較。⑥前向性(STR):也稱直線性,計算公式為VSL/VAP,亦即精子運動平均路徑的直線分離度。⑦擺動性(WOB):精子頭沿其實際運動軌跡的空間平均路徑擺動的尺度,計算公式為VAP/VCL。⑧鞭打頻率(BCF):也稱擺動頻率,即精子頭部跨越其平均路徑的頻率。⑨平均移動角度(MAD):精子頭部沿其運動軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時間平均值。⑩運動精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子數(shù)。CASA系統(tǒng)主要用于精子動力學(xué)的分析,可以評估精子的濃度、活力等參數(shù)。美國山羊精子分析精確溫度控制
精子分析儀能分析與精子運動功能相關(guān)的各種參數(shù)。廣州快速運動精子分析STR
精子分析儀是計算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備,通過顯微鏡下攝像和計算機(jī)快速分析多個視野內(nèi)精子的運行軌跡,客觀記錄了精子的密度、活動力、活動率和存活率等各項參數(shù)。計算機(jī)輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計算機(jī)處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成。此外,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統(tǒng):由顯微鏡及CCD組成??梢詫?biāo)本信號通過顯微放大由CCD傳輸?shù)接嬎銠C(jī)2.圖像采集系統(tǒng):由圖像卡構(gòu)成,其功能是對CCD信號進(jìn)行抓拍、識別、預(yù)處理后,將成熟信號輸送到計算機(jī)。3.恒溫系統(tǒng):由加溫和保溫設(shè)備組成。加溫是通過熱吹風(fēng)機(jī)不斷將適宜的溫度熱風(fēng)鼓入封閉保溫罩內(nèi),提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計算機(jī)系統(tǒng):對圖像信號進(jìn)行***系統(tǒng)的加工處理,對獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行輸出和存儲的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件,利用現(xiàn)代化的計算機(jī)識別技術(shù)和圖像處理技術(shù),對精子的動靜態(tài)特征進(jìn)行***的量化分析,對精子的密度、活力、活率、運動軌跡等特征進(jìn)行量的檢測分析廣州快速運動精子分析STR